Cell：重大突破！开发出DNA显微镜 基因序列 D条形码定

邓文龙

Cell：重大突破！开发出DNA显微镜  

基因序列 DNA“条形码”定

2019-06-22 15:52

2019年6月22日讯/生物谷BIOON/---传统上，科学家们使用光、X射线和电子来观察组织和细胞的内部。如今，科学家们能够在整个大脑中追踪线状的神经纤维，甚至可以观察活的小鼠胚胎如何产生原始心脏中的跳动细胞。但是这些显微镜无法看到的是：细胞在基因组水平上发生了什么。

如今，在一项新的研究中，美国布罗德研究所生物物理学家Joshua Weinstein、霍华德-休斯医学研究所研究员Aviv Regev和麻省理工学院分子生物学家Feng Zhang发明了一种非传统的称为“DNA显微镜（DNA microscopy）”的成像方法，它能够做到这一点。他们使用DNA“条形码”来协助确定分子在样本中的相对位置，而不依赖于光线（或者任何类型的光学器件）。相关研究结果于2019年6月20日在线发表在Cell期刊上，论文标题为“DNA Microscopy: Optics-free Spatio-genetic Imaging by a Stand-Alone Chemical Reaction”。

图片来自Cell, 2019, doi:10.1016/j.cell.2019.05.019。

Weinstein说，通过使用DNA显微镜，这些研究人员能够构建细胞图像，同时获得大量的基因组信息。“这为我们提供了另一层我们无法观察到的生物学。”

Regev说，“这是一种全新的显微镜类别。这不仅仅是一种新技术，而是一种我们以前从未考虑过要做的事情。”

新玩意

到目前为止，显微镜分为两大类。第一类是基于光学；比如，光学显微镜可追溯到17世纪，依靠可见光来照射样本。科学家们对这种方法进行了反复研究，甚至不再局限于可见光谱。电子显微镜、荧光显微镜和光片显微镜---它们的工作原理都是样本发射光子或电子，随后显微镜检测发射出的光子或电子。

第二类是在显微镜确定的位置上分割样本。然后，计算机程序将每个分割的片段拼接成完整样本的完整图片。光学成像可以提供亚细胞结构和作用的复杂图像。基于分割的显微镜可以为科学家提供遗传信息。

Weinstein和他在麻省理工学院的同事们想要构建一种一次性完成所有这一切---拍摄细胞位置的快照并找出驱动它的特定基因序列---的方法。

这种组合对于研究细胞遗传多样性的科学家来说非常重要。Weinstein说，免疫系统就是一个很好的例子。免疫细胞中的基因可发生最少单个碱基变化的变异。每种变异可引起细胞产生的抗体类型出现显著变化。细胞位于组织内部的位置也能够改变抗体产生。

他说，如果你专注于其中的一种变异，那么“你仅了解其中的一部分”。

它是如何发挥作用的？

Regev说，捕获完整的细胞图片并不需要昂贵的显微镜或许多花哨的设备。所有你开始需要的是标本和移液器。

首先，这些研究人员获取实验室中培养的细胞，并将它们固定在反应室中。然后，他们添加了各种各样的DNA条形码。这些DNA条形码结合RNA分子，从而给每个RNA分子一个独特的标签。接下来，他们使用化学反应来让每个标记分子产生越来越多的拷贝---一个从每个分子的原始位置扩展出来的生长堆（growing pile）。

Weinstein说道，“将每个分子想象为一个向外传播自己信号的无线电塔。”

最终，标记的分子与其他标记的分子碰撞，迫使它们成对连接在一起。彼此靠近的分子更容易碰撞，因而产生更多的成对DNA。距离相隔较远的分子将产生较少的成对DNA。

DNA测序仪会读取样品中每个分子的碱基序列，这需要长达30个小时。这些研究人员开发出的算法随后解码这些数据---在本文中，这些数据代表来自每个原始样本的基因序列的大约5000万个DNA碱基---并将原始数据转换为图像。

Weinstein 说，“你基本上能够完全重建你在光学显微镜下看到的东西。”

他补充说，这两种方法是互补的。光学显微镜可以很好地观察到分子，即使它们在样品中是稀少的，而当分子密集---甚至彼此堆积在一起时，DNA显微镜表现更好。

他认为DNA显微镜有朝一日可能能够让科学家们加快开发帮助患者免疫系统对抗癌症的免疫疗法。他说，这种方法可能潜在地识别出最适合靶向特定癌细胞的免疫细胞。

Zhang说，每个细胞都有独特的DNA碱基组成。“通过直接从被研究的分子中获得信息，DNA显微镜开辟了一种将基因型与表型关联在一起的新方法。”

Regev补充道，这类显微镜的可能性应用是非常广泛的。“我们希望它能激发人们的想象力，让他们受到我们从未想过的伟大想法的启发。”（生物谷 Bioon.com）

参考资料：

Joshua A. Weinstein et al. DNA microscopy: Optics-free spatio-genetic imaging by a stand-alone chemical reaction. Cell, 2019, doi:10.1016/j.cell.2019.05.019.

https://www.cell.com/cell/fullte ... 71%3Fshowall%3Dtrue

http://news.bioon.com/article/6740136.html



华成旅行社  欢迎来电咨询：

电话：03-3833-9823  / 03-5688-1863
FAX ：03-3833-9873  / 03-3834-5891

SOFTBANK电话：080-3398-4381   担当：小郭  微信号：08034162275
SOFTBANK电话：090-2172-4325   担当：小于  微信号：TYOSCL4325
SOFTBANK电话：080-3398-4387   担当：小李  微信号：huacheng4387
SOFTBANK电话：080-3398-4362   担当：小何  微信号：huacheng602
SOFTBANK电话：080-3084-4389   担当：小马  微信号：huacheng858

http://www.kaseisyoji.com/forum.php?mod=forumdisplay&fid=10

邓文龙

张锋跨界发明DNA显微镜，彻底改造显微镜，曾六获诺奖的显微镜会给张锋带来好运吗？

来源：BioWorld 2019-06-24 17:13

如果要评选一个人类历史上最伟大的发明，那么显微镜一定能名列前茅。

在显微镜发明之前，人类对于世界的观察只局限于肉眼。当列文虎克使用他自制的显微镜观察到细胞和微生物后，一个全新的微生物世界在人类眼前打开。此后，恩斯特·鲁斯卡于1931年发明电子显微镜，使得人们能够直接在原子水平观察，显微镜将人类视野带到了一个之前从未触及的微观世界，人类开始对自己和自己所处的这个世界有了更深入的认知。

显微镜可分为两大类：光学显微镜和电子显微镜，人们早在几百年前使用光学显微镜观察到了细胞，近年来用冷冻电镜观察到了蛋白的三维立体结构，然而，这两类显微镜都无法再基因组水平观察细胞。

2019年6月20日，作为CRISPR基因编辑的奠基人之一的张锋教授，在Cell杂志发表了一篇重磅论文，张锋及其合作者开发了一种全新的显微镜：DNA显微镜。

DNA显微镜，不依赖光或任何类型的光学器件，通过独特的成像模式，可将物理图像编码为DNA，并以精确的序列信息推断细胞分辨率的原始转录物的物理图像，从而实现在基因组水平上对细胞的观察。

通过DNA显微镜，科学家们可以构建细胞图像并同时积累大量的基因组信息。为人们提供了另一层之前无法看到的生物学世界。

论文题目：DNA Microscopy： Optics-free Spatio-genetic Imaging by a Stand-Alone Chemical Reaction.



使用DNA显微镜识别样品中的不同细胞（图中不同的彩色的点）

使用DNA显微镜（下图左），可以准确地重建用荧光显微镜捕获的细胞图像（下图右），比例尺=100微米。



显微原理

使用DNA显微镜获取一个完整的细胞图片，可以说非常简单，只需要一个样本和和一个移液器。

首先，将实验室中培养的细胞固定在反应室中。 然后，添加各种各样的DNA条形码。 它们连接上RNA分子，给每个分子一个独特的标签。接下来，该团队使用化学反应来制作每个标记分子的越来越多的副本，一个从每个分子的原始位置扩展出来的不断增长的分子堆。

最终，标记的分子与其他标记的分子碰撞，迫使它们成对连接在一起。 彼此靠近的分子更容易碰撞，产生更多的DNA对。分开的分子将产生更少的DNA对。

大约花费30个小时的时间后，DNA测序仪拼出样品中每个分子的碱基。然后通过该团队创建的算法解码数据，将每个原始样本中约5000万个基因序列的DNA碱基转换为图像。

这样，就可以完全重建在光学显微镜下看见的东西。

应用前景

张锋认为，每个细胞都是由独特的DNA序列或基因型组成，使用DNA显微镜可以直接从被研究得分子中捕获信息，DNA显微镜开辟了一种将基因型和表型联系起来得全新方法。

Aviv Regev认为，DNA显微镜的有着无限的可能性，希望它能够激发人们的想象力，去开发更大更多我们从未想过的创意。

论文的第一作者Weinstein认为，有一天DNA显微镜可以让科学家加速免疫疗法治疗的发展，帮助患者免疫系统对抗癌症，该方法可能潜在地识别出最适合靶向特定癌细胞的免疫细胞。这种新型显微镜类别，不仅仅是一种新技术，更是一种我们以前从未考虑过的显微方式。

该论文早在2018年11月9日，就已在预印本网站 BioRxiv 上线，这次是正式发表于 Cell 杂志。



上线时间：2018年11月19日

该研究的通讯作者：张锋、Aviv Regev

出生于1982年的张锋，是麻省理工学院终身教授，CRISPR基因编辑开创者之一，上市公司Editas Medicine的创始人，当今最为人所关注的华人生物学家。

张锋的科研生涯可谓传奇，2004年-2011年，张锋在斯坦福大学神经科学家 Karl Deisseroth 教授实验读博和学习，在此期间，Karl Deisseroth教授同张锋等人开创了光遗传学这一全新的研究领域。

2011年，张锋加入麻省理工学院，开始自己的独立科研生涯，2013年，张锋首次将CRISPR/Cas9基因编辑技术成功应用与哺乳动物和人类细胞，从此，张锋随着CRISPR一起大放异彩。

年仅30岁的他就参与开创了两项热门技术领域（光遗传学和CRISPR）。

这一次，张锋又开创了一类新型显微镜。

要知道，显微镜技术一共获得过6次诺贝尔奖，三次获物理奖，三次获化学奖。分别是：

1953年的物理学奖颁给了相位差显微镜，1982年的化学奖颁给了晶体电子显微技术，1986年的诺贝尔物理学奖颁给了电子显微镜和扫描隧道显微镜，2014年的诺贝尔化学奖颁给了超分辨率荧光显微镜，2017年诺贝尔化学奖颁给了冷冻电子显微镜技术。

现在我们可能要讨论他会因基因编辑还是DNA显微镜获得诺贝尔奖了。（生物谷Bioon.com）

论文链接：

https：//www.cell.com/cell/fulltext/S0092-8674(19)30547-1#

解析部分参考链接：

https：//www.hhmi.org/news/dna-microscopy-offers-entirely-new-way-to-image-cells

http://news.bioon.com/article/6740174.html