EB病毒Rta蛋白抗体IgG在鼻咽癌诊断中的应用

现代化研

中国癌症防治杂志2009年9月第1卷第3期Chin J ofOncol Prey and Treat，sep 2009，VoL 1，Nn 3 ·211·

EB病毒Rta蛋白抗体IgG在鼻咽癌诊断中的应用

朱文良2 粱新强1 章 阳2 陈丽霞2 丰大利2 宛 月2 李 全3 焦守恕3 崔 英1
作者单位：530021南宁1广西医科大学肿瘤医学院；2广西医科大学研究生学院；3北京同听生物技术有限公司
【摘要】目的 检测EB病毒Rta蛋白抗体Igc在鼻咽癌初治患者血清中的表达水平，并探讨其与鼻咽癌临床分期的
关系。方法采用酶联免疫吸附试验检测274例鼻咽癌未治疗患者及353例健康体检者血清中Rta·IgG水平，比较鼻咽
癌患者和健康体检者Bta—IgG的表达水平及与临床分期的关系。结果鼻咽癌组与对照组比较，Rta-IgG表达水平的差异
有统计学意义(P<0．01)。Rta—Igc表达水平与鼻咽癌临床分期无统计学意义(P>0．05)。结论应用ELISA法检测
Rta-IgG的表达可以应用于鼻咽癌的诊断和鉴别诊断，但与鼻咽癌临床分期无关。
【关键词】鼻咽癌；Rta-IgG；临床分期
【中图分类号】R 739．6 【文献标识码lA 【文章编号】1674-5671(2009)03-03
doi：10．3969／j．issn．1674-5671．2009．03．06
Applying EBV Rta--IgG in diagnosis of nasopharyngeal carcinoma

3讨论
Rta蛋白是EB病毒由潜伏期到裂解期立即早期
(immediate early)BRLFl基因编码的产物，是一种
EBV反式激活蛋白，由605个氨基酸组成，可以分为
一个DNA结合(二聚)区和一个活化区，分别定位在
N一末端230个氨基酸处和C一末端部分。Rta蛋白
也能促进EB病毒其他产物的表达，例如Yao等发现
异位的Rta蛋白能够诱导LMPl在上皮细胞和淋巴细
胞中表达…。1996年，Zalani等【21通过体外试验发
现，Rta能以一种上皮特异性的方式激活宿主细胞中
EBV从潜伏期到裂解期的转化。Ragoczy等”1也认
为，Rta的单独表达足够破坏B淋巴细胞中EBV的潜
伏状态，例如在HH514—16细胞中，Rta的转染导致
了病毒DNA的复制以及早晚期基因的表达。Feederle等H1和uu等"1的研究都证实了这一点。尤其在
EB病毒的裂解早期就能表达Rta蛋白，然后通过Rta
蛋白和Zta蛋白的作用促进EB病毒其他一系列基因
的表达，这提示Rta和Zta蛋白可以作为一种早期标
志物应用于NPC的临床检测和筛查。
本研究应用Rta蛋白作为抗原，用ELISA法检测
初治NPC病人和对照人群血清中的特异性抗体k,G，
实验结果表明NPC组病人的OD值明显高于对照组，
差异有统计学意义(P<0．01)。用ELISA法检测血
清中的Rta蛋白抗体IgG，灵敏度达82．12％，特异度
为91．78％。因此本方法可以用于NPC的临床检测
和筛查。Feng P等∞1用Rta蛋白作为抗原检测NPC
病人和对照血浆中特异性抗体的表达情况，结果发现
53例NPC病人血清样本中检测出44例(83．0％)，针
对Rta的IgG抗体而53例正常对照中只有l例
(1．9％)阳性。进一步研究发现，抗体结合区域位于
Rta氨基酸C．末端2／3的部分。这一血清学实验结
果间接证实了BRLFI在NPC肿瘤细胞中有特异性表
达。2006年曾毅院士的研究组以Rtac2／3为抗原用
万方数据
中国癌症防治杂志2009年9月第1卷第3期Chin J 0fOneolPrey andTreat，sep2009，"CoLl，Nn3 ·213·
于鼻咽癌病人检测。以表达和纯化的BRLFl基因C
端2／3部分蛋白(Rtae2／3)建立间接ELISA方法，检
测了59份NPC患者血清中的抗Rta／Ig(；抗体，同时
以59份健康者血清作对照。结果59份NPC患者血
清中50份阳性，而59份健康者对照血清中只有7份
阳性。NPC组的阳性率与健康对照组之间差异有统
计学意义(P<O．01)。此方法的灵敏度为84．7％，特
异性为88．1％【7J。上述结果迸一步验证了检测人血
清中的抗Rta·IgC可以作为NPC诊断的重要标志物
之一，与本次试验结果一致。胡怀中等又进一步研究
了BRLFl基因中抗原决定簇丰富且抗原性高、与人
类蛋白质没有同源性的区域，即BRLFl．185I和
BRLFl—150I两个片段，并用分子克隆的方法构建出
融合的原核表达载体。获得GST．R185I和GSTR150I两种重组融合蛋白质，将两种融合蛋白混合作
为抗原，以间接ELISA的方法，分别检测了5l例鼻咽
癌病人和47例正常对照组血清样品中Rta-[gc和
Rta—IgA，结果在5l例鼻咽癌病人血清中，有42例
(82．3％)表现为ltta-[gc阳性。而在47例正常人血
清中，只有5例(10．6％)表现为Rta．IgG阳性。综上
所述，检测血清中ltta—IgG在鼻咽癌诊断中有重要的
应用价值。在NPC临床分期中，各期别患者血清中
Rta—IgG的阳性率和OD值比较，各临床分期之间没有
统计学意义(P>0．05)，但在早期和晚期者的比较
中，P值处于临界范围(P=0．051)，可能I期病例数
较少，有待进一步研究。因此本方法可以用于NPC
的临床检测和现场高危人群的筛查，但是Rta蛋白抗
体IgG与鼻咽癌的发生发展、浸润及转移相关性值得
进一步探索。

http://www.bjrta.com.cn/Upload/% ... %A8-15554246501.pdf

http://d.g.wanfangdata.com.cn/Pe ... zlxfc200903006.aspx