在一项新的研究中,来自美国加州大学旧金山分校的研究人员设计出一种基于CRISPR的称为SLICE(single guide RNA lentiviral infection with Cas9 protein electroporation, 即利用Cas9蛋白电穿孔进行单向导RNA慢病毒感染)的系统,这种系统将使得科学家们能够快速评估直接从患者体内提取出的“原代”免疫细胞中每个基因的功能。这种新方法为科学家们提供了一个强大的工具,能够在确定如何最好地改造免疫细胞来对抗癌症和一系列其他疾病时指导他们作出决策。相关研究结果于2018年11月15日在线发表在Cell期刊上,论文标题为“Genome-wide CRISPR Screens in Primary Human T Cells Reveal Key Regulators of Immune Function”。论文通讯作者为加州大学旧金山分校微生物学与免疫学副教授Alexander Marson博士。论文第一作者为加州大学旧金山分校的Eric Shifrut 和Julia Carnevale。
SLICE建立在Marson实验室近期的一项发现之上。在2018年7月,Marson实验室在Nature期刊上报道,他们利用电穿孔将基于CRISPR的基因编辑构造体运送到免疫细胞中(Nature, Published online: 11 July 2018, doi:10.1038/s41586-018-0326-5,详细报道参见生物谷新闻:Nature:重大突破!无需病毒载体,利用电穿孔成功对人T细胞进行CRISPR基因编辑)。在电穿孔中,细胞受到电击后吸收来自细胞外面的分子。SLICE采用一种混合方法,将Marson实验室的这种电穿孔方法的最佳方面与利用病毒运送CRISPR系统组分的更常规方法结合在一起。一旦SLICE识别出基因组靶标,这种基于电穿孔的CRISPR方法就可用来重新改造这些靶标并对免疫细胞进行重编程,从而提高这些免疫细胞的治疗能力。
Eric Shifrut, Julia Carnevale, Victoria Tobin et al. Genome-wide CRISPR Screens in Primary Human T Cells Reveal Key Regulators of Immune Function. Cell, Published Online: 15 November 2018, doi:10.1016/j.cell.2018.10.024.